２本鎖ＲＮＡ複合体を用いたＲＮＡ干渉法（理研No: :21927）
発明者
阿部洋、伊藤嘉浩、阿部奈保子（伊藤ナノ医工学研究室）
キーワード
RNA干渉、核酸医薬
本技術の特徴
RNA干渉は、がん、遺伝子疾患や感染症などさまざまな疾患治療における医薬品開発への応用が期待されている重要な現象です。しかし、RNA分子は細胞内のヌクレアーゼで容易に分解されてしまうため生体内で極めて不安定であることが医薬品開発における問題となっています。
２本鎖ＲＮＡの生体内での安定性を高めるための技術としては、非天然ヌクレオシドを導入したＲＮＡ鎖が開発されましたが、安定性は高くなるものの生物活性は下がってしまうことが問題でした。さらに、非天然ヌクレオシドが生体に与える毒性も未知であり、医薬品への応用は困難でした。
本発明者らは、２本鎖ＲＮＡの生体内での安定性を向上させるための別のアプローチとして、環状１本鎖ＲＮＡ（ダンベル型ＲＮＡ）を開発しました。このダンベル型ＲＮＡは、２本鎖ＲＮＡの両端がループ状に閉じているために、ＲＮＡ末端がなくなり、細胞内においてダイサーなどの特異的酵素以外は、分解酵素エキソヌクレアーゼなどの基質となりにくく、分解されにくいという特徴を持ちます(Journal of the American Chemical Society, 129, 15108-15109 (2007)., WO2008/140126)。
さらに本発明者らは、このダンベル型ＲＮＡのステム部分を連結する２つのループ部分を、ポリアルキレングリコール、ＤＮＡ、ＤＮＡとＲＮＡのキメラ等とすることで、２本鎖ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）のみならずループ部分がＲＮＡのみからなる環状１本鎖ＲＮＡやヘアピン構造を有する２本鎖ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）と比べてより細胞内または生体内安定性が向上させることができ、かつダイサーによるＲＮＡの切断が阻害されないため、ＲＮＡ干渉においてより持続的および徐放的な効果を発揮することができることを見出しました。
（文献情報）
- PCT/JP2009/052945
（2011年6月掲載）